基因工程包括以下项目:
基因重组:
将不同来源的基因按预先设计的蓝图,在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞,以改变生物原有的遗传特性。
克隆:
将某个生物体的基因复制并插入到另一个生物体中,使其表达出相同的基因产物。
重组DNA技术:
将来自不同生物的基因与有自主复制能力的载体DNA在体外人工连接,构成新的重组DNA,然后送到受体生物中去表达,从而产生遗传物质的转移和重新组合。
基因表达载体的构建:
设计并构建适合转移和表达目的基因的载体,如质粒,以便将目的基因导入受体细胞并进行表达。
目的基因的获得:
从基因库获取、利用PCR技术扩增等方法获得目标基因。
目的基因的检测与鉴定:
通过凝胶电泳、菌落PCR等方法对导入受体细胞的目的基因进行检测与鉴定。
基因工程菌或细胞的大规模培养:
培养基因工程菌或细胞,以便进行基因产物的分离纯化。
基因产物的分离纯化:
从培养物中分离并纯化基因工程菌或细胞表达的目的蛋白或多肽。
应用:
基因工程在作物育种、药物研制、生物制药等领域有广泛应用,如生产胰岛素、干扰素、乙肝疫苗等。
实验技术:
包括基因组DNA的提取、总RNA和mRNA的提取、质粒DNA的提取、限制性内切酶的酶切反应、凝胶电泳、DNA片段的体外连接、大肠杆菌感受态细胞的制备、重组子的转化、菌落PCR筛选阳性重组子、重组质粒的酶切鉴定、外源基因在大肠杆菌中的诱导表达、基因表达产物的检测分析、Western Blotting实验、Southern印迹实验、全长cDNA文库的构建、凝胶阻滞实验和染色质免疫共沉淀技术等。
这些项目涵盖了基因工程的多个方面,从基础的理论和技术到应用开发,为基因工程的研究和应用提供了全面的支持。