基因工程实验包括以下项目:
基因组DNA的提取
植物基因组DNA的提取
动物基因组DNA的提取
细菌基因组DNA的提取
酵母菌基因组DNA的提取
总RNA和mRNA的提取
Trizol法提取总RNA
异硫氰酸胍/酚一步法提取总RNA
总RNA提取试剂盒
mRNA的分离纯化
质粒DNA的提取
碱裂解法少量提取质粒DNA
少量质粒提取试剂盒
目的基因的获得
PCR扩增
反转录PCR
限制性内切酶的酶切反应
pUC18/19质粒DNA的EcoRI单酶解
HindⅢ和Sal I对pUC18/19质粒DNA的双酶切
凝胶电泳法进行DNA的分离和纯化
DNA片段的体外连接
大肠杆菌感受态细胞的制备
重组子的转化
菌落PCR筛选阳性重组子
重组质粒的酶切鉴定
外源基因在大肠杆菌中的诱导表达
基因表达产物的检测分析
SDS-PAGE
Western Blotting(蛋白免疫印记)
Southern印迹实验
全长cDNA文库的构建
凝胶阻滞实验
染色质免疫共沉淀技术
这些实验涵盖了基因工程的多个关键步骤,从DNA的提取、基因的克隆、表达到表达产物的检测和分析。通过这些实验,学生可以深入理解基因工程的基本原理和操作技术。