基因工程实验包括以下项目:

基因组DNA的提取

植物基因组DNA的提取

动物基因组DNA的提取

细菌基因组DNA的提取

酵母菌基因组DNA的提取

总RNA和mRNA的提取

Trizol法提取总RNA

异硫氰酸胍/酚一步法提取总RNA

总RNA提取试剂盒

mRNA的分离纯化

质粒DNA的提取

碱裂解法少量提取质粒DNA

少量质粒提取试剂盒

目的基因的获得

PCR扩增

反转录PCR

限制性内切酶的酶切反应

pUC18/19质粒DNA的EcoRI单酶解

HindⅢ和Sal I对pUC18/19质粒DNA的双酶切

凝胶电泳法进行DNA的分离和纯化

DNA片段的体外连接

大肠杆菌感受态细胞的制备

重组子的转化

菌落PCR筛选阳性重组子

重组质粒的酶切鉴定

外源基因在大肠杆菌中的诱导表达

基因表达产物的检测分析

SDS-PAGE

Western Blotting(蛋白免疫印记)

Southern印迹实验

全长cDNA文库的构建

凝胶阻滞实验

染色质免疫共沉淀技术

这些实验涵盖了基因工程的多个关键步骤,从DNA的提取、基因的克隆、表达到表达产物的检测和分析。通过这些实验,学生可以深入理解基因工程的基本原理和操作技术。

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