高密度养殖中培菌种的方法主要包括以下几个步骤：

确定开始补料的时间

目的是延长菌体的对数期，积累菌体数量。

方法：每隔一段时间，从发酵罐中取一定量菌液，稀释合适的倍数，分装两管，一管倾倒平板，另一管灭活菌体后，倾倒平板。分别计数，求差值，求得所取菌液中的菌体含量。作图，预期结果：确定对数期和稳定期，对数期后期即可开始补料。

补料液流速

不同的发酵罐以不同的流速同时补料，持续一段时间，取菌液，方法如上所述。

可以通过增大罐压、通入纯氧（混合不均，易养中毒）或化学方法（如加入H2O2，利用菌体产生的过氧化氢）来调节。

菌种选择与处理

应选择纯度高、活力强、遗传性稳定的菌种。

菌种处理包括：

斜面试管培养：将菌种接种在斜面试管培养基上，25℃下培养2-3天，待菌丝长满斜面后，用于进一步扩大培养。

液体悬浮培养：将菌种接种到液体培养基中，振荡培养，以增加菌种的悬浮性和活力。

培养基配制与灭菌

培养基配制应根据不同食用菌的生长需求配制适宜的培养基，常用的培养基成分包括碳源、氮源、无机盐和生长因子。

灭菌方法通常采用高压蒸汽灭菌法，温度达到121℃，压力为1.05kg/cm²，维持15-30分钟。

接种与培养

接种是菌种培养的关键步骤，应选择无菌操作环境，使用火焰灭菌过的接种工具，从纯化的菌种中挑取健康的菌丝进行接种。

接种后，将培养基放入培养箱中进行培养，培养条件包括温度、湿度和通风等，这些条件应根据不同食用菌的需求进行调整。

菌种的扩大培养

摇瓶培养：将接种后的菌种放入摇瓶中，在适宜的条件下振荡培养，以扩大菌种数量。

发酵罐培养：对于大规模培养，可使用发酵罐进行深层发酵，进一步提高菌种的密度。

菌种的保存

冷冻保存：将菌种接种在冷冻保存管中，加入甘油或其他保护剂，密封后存放于-80℃的低温冰箱中。

干燥保存：将菌种干燥后，存放在干燥的环境中，以延长保存时间。

通过以上步骤，可以实现高密度养殖中菌种的培养与扩增。建议在实际应用中，根据具体的食用菌种类和生长需求，调整培养条件和保存方法，以确保菌种的高密度培养和高效利用。